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化學發光免疫分析在腫瘤標記物檢測上的應用
時間:2018-12-20 瀏覽次數:

        現在,隨著社會發展,環境污染及精神壓力的加重,給我們的生活帶來了更多的健康危機!

在我國,平均每五個死亡人中,就有一人死于癌癥,僅廣東省每7.5分鐘就有一人死于癌癥,死亡人群通常在35-54歲的壯年群體。

        為什么腫瘤難以發現,且發現晚?癌癥是否真的是不治之癥?根據WHO的統計數據指出:腫瘤如果早期查出治愈率達80~95%,中期查出治愈率達20~30%,晚期查出則只能延長生命;由此可見,早發現、早診斷是治愈癌癥的關鍵。但是現代人聞”癌“色變,開玩笑的說:“被癌癥嚇死的,比得癌癥死亡的還多”,雖然夸張了些,也由此看出了人們對癌癥的恐懼,那么……難道科學發展的今天,人們對腫瘤就沒有辦法了嗎?答案是……NO,“多腫瘤標記物檢測”,醫療檢測手段劃時代的革命,人類生命科學進程中的里程碑。現在的你是不是在疑問,多腫瘤標記物檢測要如何檢測,檢測什么指標,又和那些疾病有關……


腫 瘤 標 記 物


CLIA


腫瘤標記物是腫瘤細胞本身存在或分泌的特異性物質。應具備的特征:

1、必須由惡性腫瘤細胞產生,可在血液、組織液、分泌液或腫瘤組織中測出

2、不應存在于正常組織和良性疾病中

3、某一腫瘤的腫瘤標記物應在該腫瘤的大多數患者中檢測出來

4、臨床尚無明確腫瘤證據之前能測出

5、腫瘤標記物的量能反映腫瘤的大小

6、在一定程度上能有助于估計治療效果、預測腫瘤的復發和轉移。


理想的腫瘤標記物應符合上述各項特征。但是,在現今所知的腫瘤標志物中,絕大多數不僅存在于惡性腫瘤中,也存在于良性腫瘤、胚胎組織,甚至正常組織中。因此,這些腫瘤標記物并非惡性腫瘤的特異性產物,但在惡性腫瘤患者中明顯增多。所以有人將腫瘤標記物稱為腫瘤相關抗原。


腫瘤標記物的分類:

  • 糖脂類:癌抗原15-3、癌抗原125、癌抗原19-9、癌抗原50、癌抗原72-4等;

  • 激素類:人絨毛膜促性腺激素、降鈣素等;

  • 酶類:前列腺酸性磷酸酶、神經元特異性烯醇化酶等;

  • 蛋白質類:甲胎蛋白、癌胚抗原、鱗狀上皮細胞抗原、組織多肽抗原、前列腺特異性抗原等;


瘤標記物作為診斷腫瘤的一項重要指標,它的檢測對于疾病治療和預后都具有重要的意義。目前發現的中落標記物已經有100多種,由于大多數情況下體內腫瘤標記物的含量非常低,一般檢測方法難以對它進行精確定量。

過去對腫瘤標記物的檢測主要用放射免疫分析法,這種方法存在很多缺點,如操作復雜、檢測結果不穩定、放射性污染、儀器昂貴等。因此,亟待發展一種新的檢測方法對腫瘤標記物進行精確的定量分析。化學發光法檢測正好適應了這種需求。


化學發光免疫分析(CLIA)

化學發光法是一種靈敏度非常高的分析方法,將具有高靈敏度的化學發光測定技術與高特異性的免疫反應相結合,用于各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測分析技術。是繼放免分析、酶免分析、熒光免疫分析和時間分辨熒光免疫分析之后發展起來的一項新的免疫測定技術。現已廣泛應用于檢測腫瘤標記物的研究中。

CLIA的優勢有哪些……

?檢測靈敏度高;

   ? 標記物穩定、

         ?試劑盒有效期長;

              ?不需要激發光源、

                  ?儀器設備簡單;

                     ? 線性范圍寬;

                          ?受外界的干擾因素少、

                             ? 信噪比高;

                                 ? 成本低、易實現全自動化等;



化學發光免疫分析技術主要由兩大體系組成

1、化學反應體系(光子具有能量ε=hν)

2、抗原抗體結合的免疫反應體系



板式化學發光與酶聯免疫的對比




板式化學發光

酶聯免疫 ELISA

載體

96孔板、不透明

96孔板、透明

底物

發光物質

顯色物質

結果檢測方法

發光儀檢測孔板中物質反應引起光子躍遷而產生的光值變化

酶標儀檢測孔板中物質反應產生的顏色變化而產生的吸光度的變化

靈敏度:板式化學發光>酶聯免疫法


【艾康CLIA產品】

癌胚抗原(CEA)檢測試劑盒(化學發光法)

甲胎蛋白(AFP)檢測試劑盒(化學發光法)

總前列腺特異性抗原(tPSA)檢測試劑盒(化學發光法)

糖類抗原19-9(CA19-9)檢測試劑盒(化學發光法)

糖類抗原125(CA125)檢測試劑盒(化學發光法)


不同腫瘤標記物的檢測意義:

? 甲胎蛋白(AFP)

(1)、原發肝癌80%AFP>400ng/ml,僅20%AFP正常,AFP可早于影像學6-12月出現異常,為肝癌的早期診斷提供重要依據,建議肝硬化患者定期復查AFP。

(2)、病毒性肝炎、肝硬化絕大部分AFP<400ng/ml。

(3)、內胚層癌、畸胎瘤、睪丸癌、卵巢癌、胃癌等伴肝轉移者AFP可升高。

(4)、婦女妊娠3個月后,AFP開始升高,7-8個月時達高峰,一般在400ng/ml以下,分娩后3周恢復正常。妊娠期AFP異常升高,要排除胎兒神經管缺損、畸形可能。

? 癌胚抗原(CEA)

(1)、CEA升高主要見于結/直腸癌、胃癌、肝癌、肺癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宮及子宮頸癌、泌尿系腫瘤等,其他惡性腫瘤也有不同程度的陽性率。

(2)、肝硬化、肝炎、肺氣腫、腸道憩室、直腸息肉、結腸炎等良性病CEA可升高。

(3)、癌癥越晚期,CEA越高,陽性率越高;腺癌敏感,其次是鱗癌和低分化癌,分化程度越高陽性率越高。

(4)、正常人吸煙者CEA升高。

(5)、癌癥病人的胸、腹水、消化液、分泌物中的CEA常升高。

? 糖類抗原125(CA125)

(1)、卵巢癌血清CA125升高,陽性率61.4%;治療有效CA125下降;復發CA125升高先于癥狀;CA125是判斷治療和復發的良好指標。

(2)、其他非卵巢惡性腫瘤也有一定的陽性率:如宮頸癌、宮體癌、子宮內膜癌43%,胰腺癌50%,肺癌41%,胃癌47%,結/直腸癌34%,乳腺癌40%。

(3)、其他惡性腫瘤,也有不同程度的升高,但陽性率較低:如子宮內膜異位癥、盆腔炎、卵巢囊腫、胰腺炎、肝炎、肝硬化等。

(4)、在許多良性和惡性胸、腹水中發現CA125升高。

(5)、早期妊娠,也有CA125升高。

? 糖類抗原19-9(CA19-9)

(1)、胰腺癌、膽囊癌,CA19-9明顯升高,尤其是胰腺癌晚期的陽性率可達75%,是重要的輔助診斷指標,但早期診斷價值不大。

(2)、胃癌的陽性率50%,結/直腸癌的陽性率60%,肝癌的陽性率65%。

(3)、其他惡性腫瘤也有一定的陽性率:如:乳腺癌、卵巢癌、肺癌等。

(4)、某些消化道炎癥CA19-9也有不同程度的升高,如:急性胰腺炎、膽囊炎、肝炎、肝硬化、膽汁淤積性膽管炎等。


? 總前列腺特異性抗原(TPSA)

  PSA是前列腺癌的特異性標志物,也是目前公認的唯一具有器官特異性腫瘤標志物。血清TPSA升高一般提示前列腺存在病變(前列腺炎、良性增生或癌癥)

  TPSA測定還可用于監測前列腺癌患者或接受激素治療患者的病情及療效,90%前列腺癌術后患者的血清TPSA值可降至不能檢出的痕量水平,若術后血清TPSA值升高,提示有殘存腫瘤。放療后療效顯著者,50%以上患者在2個月內血清TPSA降至正常。

  正常參考值:0.01~4.0 ng/ml


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